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想了解的傷口愈合插件嗎?看這里!

更新時(shí)間:2021-11-16   點(diǎn)擊次數(shù):1634次
  傷口愈合插件可以在藥物處理或者基因沉默/過(guò)表達(dá)后進(jìn)行細(xì)胞遷的分析。重要的是,未處理的對(duì)照組可以在同一個(gè)培養(yǎng)器皿里面接種,分析,共享同樣的培養(yǎng)液。和其他傷口形成技術(shù)不同,培養(yǎng)愈合插件適合2D侵襲實(shí)驗(yàn)和共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),同時(shí)可以實(shí)驗(yàn)兩種,三種甚至四種細(xì)胞類(lèi)型或者處理方式。
 
  如何利用傷口愈合插件做一個(gè)傷口愈合、遷移實(shí)驗(yàn)?典型的傷口愈合和遷移實(shí)驗(yàn)的結(jié)果就是隨著時(shí)間的變化細(xì)胞覆蓋面積(傷口閉合)的變化。進(jìn)行傷口愈合和遷移實(shí)驗(yàn)是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的操作:
 
  1.在細(xì)胞單層間制造出一個(gè)物理傷口。
 
  2.在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行拍照,或者進(jìn)行實(shí)時(shí)成像觀察細(xì)胞遷移到傷口的過(guò)程。
 
  3.采用手動(dòng)或者自動(dòng)化軟件分析傷口閉合的速率,這就是典型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
 
  由于特殊設(shè)計(jì)的底部,傷口愈合插件黏附在表面,阻礙了壁下任何細(xì)胞的生長(zhǎng)。移除培養(yǎng)插件后,新形成的無(wú)細(xì)胞傷口處沒(méi)有任何殘留。這種方法可以重復(fù)地形成高度一致的沒(méi)有任何細(xì)胞的傷口。當(dāng)放置在平整,干凈的表面,培養(yǎng)插件2孔給培養(yǎng)的細(xì)胞提供了兩個(gè)儲(chǔ)液池,中間被500μm厚度的壁給分隔開(kāi)。細(xì)胞接種在儲(chǔ)液池中培養(yǎng),一直到他們貼壁,形成單細(xì)胞層。移除表面的硅膠插件后會(huì)形成兩個(gè)精確大小的細(xì)胞斑塊,由一個(gè)大小和分割壁一樣寬度的區(qū)域所分開(kāi)。接著就可以通過(guò)活細(xì)胞成像或者在不同時(shí)間點(diǎn)拍照來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞遷移。
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