成 人免费va视频-成 人片 黄 色 大 片-成 人色 网 站www-成 人网站免费-成 人影片 免费观看-成av免费大片黄在线观看

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) >技術(shù)文章>組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟

組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2016-12-30   點(diǎn)擊次數(shù):2305次

組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟


實(shí)驗(yàn)步驟

1、首先將上海凈信的組織研磨機(jī)上的制冷模塊預(yù)先置于-20℃,使用時(shí)取出安裝好。將研磨珠去RNA酶處理。

2、隨機(jī)抽取小鼠的尾巴100µg,把樣本剪成盡可能小段,置于無(wú)RNA酶的2研磨單位離心管中(選擇耐液氮冷凍管子),同時(shí)加入1顆5號(hào)研磨珠和2顆3號(hào)研磨珠(如果選擇1.5研磨單位離心管,只需要加入4-5顆3號(hào)研磨珠)。

3、放置于液氮中一起浸泡3分鐘,取出放置于預(yù)冷模塊中,在全自動(dòng)樣品研磨儀上選擇13單位頻振研磨60s。(該步驟可以根據(jù)研磨的細(xì)微程度要求可以再重復(fù)一遍)

4、把研磨好的樣本加入0.06ml的PBS0.14ml的RNAiso Plus(此處選擇PBS,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入其他提取液,如1ml TRIzol等),繼續(xù)置于研磨機(jī)上選擇13單位頻振研磨60s。樣本將處于糊狀。(其他提取試劑有可能會(huì)出現(xiàn)泡沫,不影響實(shí)驗(yàn))

5、取出研磨管,放入冷凍離心機(jī)中,于4度,12000g離心10分鐘

6、小心吸取上清液0.1ml至新的1.5研磨單位離心管中,蓋上管蓋,在室溫上孵育15分種,使樣品充分裂解至勻漿液較透明,如果仍有少量顆粒屬于正常情況,不影響RNA提取質(zhì)量和得率。

7、在1.5研磨單位離心管中加入0.02ml氯(空)仿,蓋緊管蓋,振蕩混勻并將其在冰上孵育15分種,于4度,12000g離心15分鐘。離心后混合物分層:上清層,中間層,下層;RNA存在于上清層中。

8、將上清層小心轉(zhuǎn)移到一干凈的離心管中,加入等體積冰浴的異丙醇,顛倒振蕩混勻,將混合的樣品在-20度條件,孵育20分種,于4度,12000g離心10分鐘。RNA沉淀通常形成片狀沉淀附著于管壁或管底。

小心棄去上清,用1ML的冰浴75%的乙醇洗滌RNA沉淀一次,顛倒洗滌離心管管壁,并旋渦振蕩樣品,盡可能讓沉懸浮,于4度,12000g離心5分鐘,再次去除上清,晾干沉淀。

10、操作的zui后,在陰涼處適度干燥RNA沉淀(避免過(guò)分干燥,那樣會(huì)降底它的可溶性)。

11、用適量(一般可用0.01—0.02ml)的無(wú)RNA酶水或TE溶液來(lái)溶解RNA。抽提好的RNA,保存于-70度。

網(wǎng)站首頁(yè) 關(guān)于我們 新聞中心 產(chǎn)品中心 聯(lián)系我們
備案號(hào):浙ICP備14014839號(hào)-1   GoogleSitemap   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸
©2025  衢州新芝生物科技有限公司(www.enjoycars.cn) 版權(quán)所有 總訪問(wèn)量:395475

浙公網(wǎng)安備 33080202000501號(hào)

主站蜘蛛池模板: 色综合天天综合网国产国产人 | 久久艹国产 | 免费一级淫片 | 激情五月综合网 | 亚洲情综合五月天 | 四虎在线最新地址公告 | 富二代啪啪精品网站 | 中文伊人 | 91精品国产综合久久久久 | 免费a级特黄国产大片 | 狠狠色丁香婷婷综合视频 | aaa级大片 | 毛片大全网站 | 亚洲a成人 | 青青国产成人精品视频 | 综合久久久久久久 | 国产免费青青青免费视频观看 | 四虎影视免费永久在线观看黄 | 99热免费观看 | 久久中文字幕综合不卡一二区 | 亚洲国产精品ⅴa在线观看 亚洲国产精品aa在线看 | 精品久久久久久久久中文字幕 | 午夜视频久久久久一区 | 精品国产一区二区三区四区不 | 青青青青久久精品国产h | 国产成人精品区在线观看 | 国产亚洲精品久久午夜 | 在线免费观看亚洲视频 | 99香蕉国产精品偷在线观看 | 久久日韩在线 | 奇米狠狠操 | 天天干成人网 | 4虎影院在线观看 | 久久精品久久精品 | 亚洲人成网i8禁止 | 亚洲综合网在线观看 | 色综合天天综久久久噜噜噜久久〔 | 成人午夜视频在线观看 | 天天天天躁天天天天碰 | 精品国产日韩亚洲一区在线 | 婷婷视频网站 |